फ्लोरोसेन्स माइक्रोस्कोप एक प्रकारको अप्टिकल माइक्रोस्कोप हो जसले नमूनालाई उज्यालो पार्न र नमूनामा फ्लोरोक्रोमहरू उत्तेजित गर्न उच्च-तीव्रताको प्रकाश स्रोत प्रयोग गर्दछ। नमूनाको रोशनी सामान्यतया पराबैंगनी प्रकाश उत्सर्जन गर्ने प्रकाश स्रोतको साथ गरिन्छ। तिनीहरू जैविक, चिकित्सा र औद्योगिक क्षेत्रहरूमा व्यापक रूपमा प्रयोग गरिन्छ।
फ्लोरोसेन्स माइक्रोस्कोपले कसरी काम गर्छ?
फ्लोरोसेन्स माइक्रोस्कोपले पराबैंगनी प्रकाश उत्पादन गर्न पारा वा क्सीनन बत्ती प्रयोग गर्दछ। प्रकाश माइक्रोस्कोपमा आउँछ र डाइक्रोइक मिररमा हिट हुन्छ - एउटा ऐना जसले तरंगदैर्ध्यको एक दायरालाई प्रतिबिम्बित गर्दछ र अर्को दायरालाई पार गर्न अनुमति दिन्छ। डाइक्रोइक मिररले पराबैंगनी प्रकाशलाई नमूनासम्म प्रतिबिम्बित गर्दछ। केही नमूनाहरू पराबैंगनी प्रकाशमा प्राकृतिक रूपमा फ्लोरोसेस हुन्छन् किनभने तिनीहरूमा क्लोरोफिल जस्ता फ्लोरोसेन्ट पदार्थहरू हुन्छन्। यदि हेर्नु पर्ने नमूना प्राकृतिक रूपमा फ्लोरोसेस हुँदैन भने, यसलाई फ्लोरोक्रोम भनिने फ्लोरोसेन्ट रङले दाग गर्न सकिन्छ।
फ्लोरोसेन्स माइक्रोस्कोपमा के हुन्छ?
1. प्रकाश स्रोत
सबैभन्दा सामान्य प्रकाश स्रोतहरू पारा, xenon, र LEDs हुन्। बुधले फ्लोरोसेन्स माइक्रोस्कोपको लागि उत्कृष्ट गुणस्तरको प्रकाश प्रदान गर्दछ। LEDs धेरै लोकप्रिय भइरहेका छन् किनभने तिनीहरू अन्य स्रोतहरू भन्दा कम महँगो छन् र तिनीहरूले कम ऊर्जा खपत गर्छन्।
| पारा बत्ती | Xenon बत्ती | एलईडी | |
| उत्सर्जित प्रकाशको तरंगदैर्ध्य | 350-370 nm | 400nm～ 450nm | ४००-७०० एनएम |
| जीवनकाल (घण्टा) | 200-300 | ४००-६०० | 10000 |
| फाइदा | 1. उच्च तीव्रता प्रकाश, सबैभन्दा सामान्य प्रकाश स्रोतहरू। 2. यसले सबै प्रकारका फ्लोरोफोरसहरूलाई उत्तेजित गर्न बलियो पराबैंगनी र नीलो-बैंगनी उत्सर्जन गर्दछ। 3. उज्यालो र रंगीन छविहरू। | 1. वर्णक्रमीय तीव्रता स्थिर छ। 2. इन्फ्रारेड र मिड-इन्फ्रारेडमा बलियो स्पेक्ट्रल तीव्रता। | 1. बदल्न सजिलो। 2. न्यानो अप गर्न आवश्यक छैन। 3. तुरुन्तै खोल्न र बन्द गर्न सकिन्छ। 4. प्रकाश स्रोत तीव्रता नियन्त्रण। |
| बेफाइदा | 1. छोटो जीवनकाल। 2. लामो वार्म अप समय। | 1. अधिक गर्मीको लागि विशेष कम भोल्टेज DC पावर बक्स आवश्यक छ। 2. पारा बत्ती भन्दा महँगो | 1. UV प्रकाश पारा बत्ती भन्दा कमजोर छ। 2. प्रकाशको प्रत्येक तरंगदैर्ध्यलाई तिनीहरूले उत्सर्जन गर्ने साँघुरो ब्यान्डविथको कारणले छुट्टै एलईडी चाहिन्छ। |
पारा फ्लोरोसेन्ट संलग्नक
एलईडी फ्लोरोसेन्ट संलग्नक
2. उत्तेजना फिल्टर
फ्लोरोसेन्स माइक्रोस्कोपको सञ्चालनको लागि उत्तेजना फिल्टर आवश्यक छ। यसले छोटो तरंगदैर्ध्यको प्रकाश पार गर्छ, जसलाई फ्लोरोसेन्ट डाईले अवशोषित गर्न सक्छ। साथै, यसले रोमाञ्चक प्रकाशको अन्य स्रोतहरूलाई रोक्छ।
उत्तेजना फिल्टर (बी, जी, यू, वी)
3. डाइक्रोइक मिरर
डाइक्रोइक मिरर एक प्रकारको अप्टिकल फिल्टर हो जसले अरूलाई प्रसारण गर्दा निश्चित तरंग लम्बाइमा प्रकाश प्रतिबिम्बित गर्दछ। यो उत्तेजना र उत्सर्जन तरंगदैर्ध्य अलग गर्न फ्लोरोसेन्स माइक्रोस्कोपमा प्रयोग गरिन्छ।
4. उत्सर्जन फिल्टर
उत्सर्जन फिल्टरले फ्लोरोफोरद्वारा उत्सर्जित तरंगदैर्ध्यलाई मात्र पार गर्छ र यस ब्यान्ड बाहिरका सबै अवांछित प्रकाशहरूलाई रोक्छ - विशेष गरी उत्तेजना तरंगदैर्ध्यहरू।
5. फ्लोरोसेन्ट रंगहरू
फ्लोरोसेन्ट रङहरू कार्बनिक यौगिकहरू हुन् जसमा फ्लोरोसेन्सको गुण हुन्छ, जसद्वारा तिनीहरूले अत्यधिक उज्यालो पराबैंगनी प्रकाशबाट उत्तेजित भएपछि अत्यधिक कन्ट्रास्ट देखिने हरियो प्रकाश उत्सर्जन गरेर फ्लोरोसेन्ट छवि बनाउन सक्छन्। सामान्यतया प्रयोग हुने फ्लोरोसेन्ट रंगहरू हुन्; DAPI (49,6-diamidino-2-phenylindole), acridine सुन्तला, auramine-rhodamine, Alexa Fluors, or DyLight 488।
फ्लोरोसेन्स माइक्रोस्कोप कति प्रकारका हुन्छन्?
1. अपराइट एपिफ्लुरेसेन्स माइक्रोस्कोप:
यो फ्लोरोसेन्स माइक्रोस्कोपको सबैभन्दा सामान्य प्रकार हो। फ्लोरोफोरको उत्तेजना र फ्लोरोसेन्स पत्ता लगाउने एउटै प्रकाश मार्ग (अर्थात उद्देश्य मार्फत) मार्फत गरिन्छ। बहुसंख्यक फ्लोरोसेन्स माइक्रोस्कोपहरू, विशेष गरी जीवन विज्ञानमा प्रयोग हुने एपिफ्लुरेसेन्स डिजाइनका हुन्छन्।
BS-2081F अनुसन्धान फ्लोरोसेन्ट जैविक माइक्रोस्कोप
2. कन्फोकल फ्लोरोसेन्स माइक्रोस्कोप:
कन्फोकल फ्लोरोसेन्स माइक्रोस्कोप: यस प्रकारको फ्लोरोसेन्स माइक्रोस्कोपले लेजर स्क्यानिङलाई फ्लोरोसेन्ट इल्युमिनेशनसँग मिलाएर छवि उत्पादन गर्छ। यो कोशिकाहरू र तन्तुहरूको अध्ययन गर्ने, कोशिकाहरू भित्र प्रोटीनहरू र अन्य पदार्थहरू पत्ता लगाउने, र सामग्रीको मोटाई नाप्ने जस्ता अनुप्रयोगहरूको विस्तृत दायरामा प्रयोग गर्न सकिन्छ।
BS-2081F अनुसन्धान फ्लोरोसेन्ट जैविक माइक्रोस्कोप
3. उल्टो फ्लोरोसेन्स माइक्रोस्कोप
यस प्रकारको माइक्रोस्कोपको प्रकाश स्रोत र कन्डेनसर तलतिर फर्केर शीर्षमा अवस्थित हुन्छ। परीक्षण गरिएको नमूनाको सतहको सन्दर्भमा रोशनीको कोण 90 डिग्रीमा हुनुपर्छ।
BS-2095F उल्टो फ्लोरोसेन्ट माइक्रोस्कोप
फ्लोरोसेन्स माइक्रोस्कोपका फाइदाहरू र हानिहरू के हुन्?
फाइदाहरू:
- जीवित जीवहरूमा कोशिकाहरूलाई क्षति नगरी अवलोकन गर्न सक्षम बनाउँछ
- सही रंग संग उच्च संकल्प छविहरू प्रदान गर्दछ
- कक्षहरूमा प्रत्यक्ष प्रक्रियाहरूको अध्ययनको लागि अनुमति दिन्छ
- कोशिकाहरू भित्र विभिन्न प्रकारका अणुहरू पहिचान गर्न प्रयोग गर्नुहोस्, जस्तै प्रोटीन वा न्यूक्लिक एसिड।
बेफाइदाहरू:
-यसले फ्लोरोसेन्ट डाईसँग ट्याग गरिएको सेल भित्रको विशिष्ट संरचनाहरूको अवलोकन मात्र गर्न अनुमति दिन्छ।
-फ्लोरेसेन्स प्रक्रियाको क्रममा इलेक्ट्रोन उत्तेजनाको कारणले फोटोब्लिचिंगले फ्लोरोसेन्ट रंगहरूको प्रतिक्रियाशील अणुहरूलाई असर गर्न सक्छ। नतिजाको रूपमा, प्रतिक्रियाशील रंगहरूले फ्लोरोसेन्स उत्सर्जन तीव्रताको रासायनिक गुण गुमाउन सक्छ।
- फ्लोरोसेन्ट रङले दाग लगाएपछि कोशिकाहरू फोटोटोक्सिक प्रभावको लागि संवेदनशील हुन्छन्, किनकि फ्लोरोफोर अणुहरूले छोटो-तरंग लम्बाइको प्रकाशबाट उच्च ऊर्जा फोटोनहरू अवशोषित गर्दछ।
फ्लोरोसेन्स माइक्रोस्कोपको प्रयोग के हो?
फ्लोरोसेन्स माइक्रोस्कोपहरू बायोकेमिस्ट्री, सेल बायोलोजी, माइक्रोबायोलोजी, इम्युनोलोजी, र औषधि सहित अनुसन्धान र अनुप्रयोगको विभिन्न क्षेत्रहरूमा व्यापक रूपमा प्रयोग गरिन्छ।
1. जीवविज्ञानको क्षेत्रमा, फ्लोरोसेन्स माइक्रोस्कोपले फ्लोरोसेन्ट डाई लेबलिङको सहायताले सेलुलर र सबमाइक्रोस्कोपिक सेलुलर कम्पोनेन्टहरू र गतिविधिहरूको सही र विस्तृत पहिचान गर्न सक्षम बनाउँछ।
2. चिकित्सा क्षेत्रमा, फ्लोरोसेन्स माइक्रोस्कोपले ब्याक्टेरिया र भाइरसहरूको उपस्थिति र वितरण पत्ता लगाउन, वा शल्यक्रियालाई सहज बनाउन सर्जिकल लक्ष्यहरू लेबल गर्न मद्दत गर्न फ्लोरोसेन्ट अभिकर्मकहरू प्रयोग गर्न सक्छ।
3. खनिज विज्ञानको क्षेत्रमा, फ्लोरोसेन्स माइक्रोस्कोप प्रायः अस्फाल्ट, पेट्रोलियम, कोइला, ग्राफिन अक्साइड र अन्य खनिजहरू जस्ता सहज प्रतिदीप्ति गुणहरू भएका पदार्थहरू अध्ययन गर्न प्रयोग गरिन्छ।
4. सामग्री विज्ञानमा, फ्लोरोसेन्स माइक्रोस्कोपलाई कपडा उद्योग वा कागज उद्योगमा फाइबरमा आधारित सामग्रीहरूको विश्लेषण गर्न प्रयोग गर्न सकिन्छ।
पोस्ट समय: मार्च-14-2023